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考虑蛋白琥珀酸铁的结构复杂,在与参比制剂进行药学一致性研究及评价时,推荐关注仿制药和参比制剂所用原料药的一致性,可以从本品蛋白质的组成及氨基酸种类、琥珀酸酰化位点和载铁结构3个部分确证本品的结构,尽可能采用多种方法进行结构确证。
温栗生物针对以上问题提供了以下解决方案:
※基础理化性质:1. 蛋白物精确完整分子量测定;2. cIEF 测定等电点
※蛋白质一级结构:1,精细LC-MSMS氨基酸序列分析
※蛋白质高级结构:1. CD 园二色谱 2. FTIR 红外3. DSC 4. NMR:700 MHz 高场核磁加低温探头
※其它蛋白表征检测手段:SEC-MALS测平均分子质量及部分;氨基酸组成测定;酰化反应位点和酰化程度;聚丙烯酰胺凝胶电泳分析
※铁的检测手段:穆斯堡尔谱(配位类型);二价/三价铁比例(极谱);原子力电镜(AMF);X粉末衍射 (XRPD);电子顺磁共振谱(ESR)