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产品货号相关:
| 货号 | 包装 | 描述 |
| MPBZ0025 | 25ku | Benzonase 全能核酸酶 250u/ul 25KU |
| MPBZ0100 | 100ku | Benzonase 全能核酸酶 250u/ul 100KU |
| MPBZ100K | 10000ku | Benzonase 全能核酸酶 250u/ul 10000KU |
产品描述:
UltraNuclease(全能核酸酶),又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X-100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解各种形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNA和RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。
本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化,纯度≥ 99%,可用于科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究,并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl pH 8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50% Glycerol)中,无色透明液体。
产品应用:
| 来源 | E. coli |
| 分子量(Molecular Weight) | 26.5 kDa |
| 等电点 | 6.85 |
| 纯度(Purity) | ≥ 99%(HPLC) |
| 酶活(Enzyme Activity) | 250-300 U/μL |
| 比活(Specific Activity) | ≥ 1.5×106 U/mg蛋白 |
| 最适pH(Optimum pH) | 8.0(工作范围pH 6-10) |
| 最适温度(Optimum Temperature) | 37℃(工作范围0-42℃) |
| 辅助因子(Cofactor) | 1-10 mM Mg2+ |
| 储存缓冲液(Storage Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50% Glycerol |
| 活性单位定义(Unit Definition) | 在37℃,pH 8.0反应条件下,2.625 mL反应体系中,在30 min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。 |
产品运输保存条件:
干冰运输。-15℃ ~ -25℃保存,有效期2年。
注意事项:
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本产品仅作科研用途!
产品使用方法:
1、 样本准备
贴壁细胞:去除培养基,用PBS清洗细胞,去除上清。
悬浮细胞:离心收集细胞,用PBS清洗细胞,6,000 rpm 离心10 min,收集沉淀。
大肠杆菌:离心收集菌体,用PBS清洗1次,8,000 rpm 离心5 min,收集沉淀。
2、样品处理
将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比1:(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g细胞约为109个)。
3、酶的添加
1)添加适量MgCl2将反应体系中的Mg2+ 浓度调整在1-5 mM范围内,将pH调整成8-9。
2)按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加UltraNuclease,37℃孵育30min以上。也可以跟据上表中的推荐使用量自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。
【注】全能核酸酶的酶活受离子浓度、反应温度及pH等因素的影响,初次使用时建议摸索最适浓度。
4、上清获取
以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清,再进行后续相关实验。
【注】若溶液为高盐溶液,偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。