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抗体完整结构的表征包括整体结构分析、亚基水平分析和肽图水平分析。其中,亚基水平分析对设备要求较低,分析时间短,且做为QC认证的实验方法,有助于在研发前期分析并理解抗体结构。
IdeZ蛋白酶是一种免疫球蛋白IgG特异性的半胱氨酸蛋白酶,可在IgG铰链区下方的特定位点进行酶切,使之产生完整的F(ab')2片段和Fc片段,实现抗体在亚基水平的质谱分析。IdeZ蛋白酶主要用于制备小鼠IgG2a和IgG3亚基,但对来自人、猴、兔和羊的IgG同样具有酶切活性,也可以切割嵌合IgG、Fc融合蛋白以及ADC药物。该酶广泛应用于抗体类药物的结构表征分析,制备仅包含F(ab')2片段的抗体或抗体的Fc片段,也可以用于免疫沉淀后Western检测时去除重链对于目标蛋白检测的干扰等用途。
高特异性:酶切位点单一(即CPAPNLLG / GPSVF),且只识别IgG
广泛的底物适应性:主要用于小鼠IgG2a和IgG3酶切,对来自人、猴、兔和绵羊的IgG也有较好的酶切活性
反应时间短:1-2小时快速酶切
优势:高比活、高稳定性、缓存体系无甘油