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收藏别名:C7, chemokine (C-X-C motif) ligand 10, CRG2, CRG-2, CXCL10, gIP-10, IFI10, INP10, IP-10, mob-1, SCYB10
反应种属:Mouse
检测范围:62.5pg/mL-4000pg/mL
操作步骤
1. 准备好所有需要的试剂和标准品;
2. 从已平衡至室温的密封袋中取出微孔板,未用的板条请放回铝箔袋内,重新封口;
3. 向微孔板中加入300uL洗涤液,静置浸泡30秒,弃掉洗液在吸水纸上将微孔板拍干,请立即使用不要让微孔板干燥;
4. 分别将不同浓度标准品,实验样本或者质控品加入相应孔中,每孔100uL。用封板胶纸封住反应孔,室温孵育2小时;
5. 将板内液体吸去,使用洗瓶、多通道洗板器或自动洗板机洗板。每孔加洗涤液300uL,然后将板内洗涤液吸去。重复操作3次。每次洗板尽量吸去残留液体会有助于得到好的实验结果。最后一次洗板结束,请将板内所有液体吸干或将板倒置,在吸水纸拍干所有残留液体;
6. 在每个微孔内加入100uL检测抗体。用封板胶纸封住反应孔,室温孵育2小时;
7. 重复第5步洗板操作;
8. 在每个微孔内加入100uLSA-HRP,室温孵育20分钟。注意避光;
9. 重复第5步洗板操作;
10. 在每个微孔内加入100uL显色液,室温孵育5-30分钟,注意避光;
11. 在每个微孔内加入50uL终止液,孔内溶液颜色会从蓝色变为黄色。如果溶液颜色变为绿色或者颜色变化不一致,请轻拍微孔板,使溶液混合均匀;
12. 加入终止液后30分钟内,使用酶标仪测量450nm的吸光度值,设定540nm或570nm作为校正波长。如果没有使用双波长校正,结果准确度可能会受影响;
13. 计算结果:将每个标准品和样品的校正吸光度值(OD450-OD540或OD570)、复孔读数取平均值,然后减去平均零标准品OD值。使用计算机软件作四参数逻辑(4-PL)曲线拟合创建标准曲线。另一种方法是,可以通过绘制标准品浓度做对数与相应OD值对数生成曲线,并通过回归分析确定最佳拟合线。这个过程可生成一个足够使用但不太精确的数据拟合。若样本经过稀释,计算浓度时应乘以稀释倍数。

注:提供的标准曲线数据仅供参考,应根据同次试验所绘标准曲线计算样本含量。
注意事项:
1. 请在试剂盒有效期内使用。
2. 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用。
3. 样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用稀释剂(1×)稀释后重新检测;若细胞培养上清液样本需分布稀释,除最后一步用稀释剂稀释外,其它中间稀释可采用细胞培养基。
4. 检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板技术、反应时间或温度、试剂盒的储存等。
5. 试剂盒中的终止液是酸性溶液,使用时请做好眼镜、手、面部及衣服的防护。
6. 仅供科研使用,不可用于体外诊断。
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究