His tag OneStep ELISA Kit（货号：S0C3016）

产品基本信息

• 名称：His tag OneStep ELISA Kit
• 货号：S0C3016
• 价格：￥2,800
• 规格：1x96T、5x96T、10x96T
• 抗原：His 标签（Polyhistidine-tag）
• 免疫原：重组蛋白
• 抗体类型：重组单克隆抗体（Recombinant mAb）
• 反应种属：无种属限制（Species Independent）
• 纯化方式：Protein A 纯化
• 储存条件：收到后 2-8℃储存，有效期 12 个月

产品功能与应用

核心用途：
快速定量检测重组蛋白中的 His 标签（N 端、C 端或内部），适用于哺乳动物细胞、细菌裂解液或细胞上清中的 His-tagged 蛋白高通量分析。

检测原理：
采用直接竞争 ELISA 法：样本中的 His-tagged 蛋白与预包被的 HRP 标记竞争物共同竞争结合特异性抗体，通过吸光度值反向定量样本中目标蛋白浓度，操作简便，60 分钟内完成检测。

技术参数

试剂兼容性

产品特性

• 快速高效：一步法操作，无需繁琐洗板步骤，60 分钟内完成从加样到读数，适合高通量筛选。
• 高特异性：重组单克隆抗体针对 His 标签（≥2 个组氨酸）设计，交叉反应低，兼容天然及变性环境下的 His-tagged 蛋白。
• 宽兼容性：耐受多种裂解液成分（如咪唑、尿素），直接检测粗提样本，无需预纯化。
• 稳定可靠：预包被板孔批次间一致性高，标准曲线线性良好（R²≥0.99），适配主流酶标仪。

验证数据

• 标准曲线示例：
  使用 20 kDa His-tagged 蛋白在 Assay Diluent #1 中绘制标准曲线，浓度范围 4 ng/ml - 1000 ng/ml 时，OD450 值与浓度呈显著负相关，线性关系良好（如图所示）。
• 重复性验证：
  同一样本重复检测 10 次，CV 值＜5%，显示优异的批内和批间重复性。

操作流程

1. 试剂准备：平衡试剂盒至室温，按需求稀释样本和标准品。
2. 加样孵育：样本、抗体、HRP 竞争物同时加入孔中，室温孵育 45 分钟。
3. 洗涤显色：洗板后加入 TMB 底物，反应 10 分钟，加终止液后立即读取 OD450 值。
4. 数据计算：通过标准曲线拟合计算样本中 His-tagged 蛋白浓度。

储存与注意事项

• 储存条件：未开封试剂盒 2-8℃保存，避免冻结；开封后尽快使用，剩余试剂按规格分装保存。
• 操作建议：使用前轻柔混匀试剂，避免气泡；洗涤时确保洗板彻底，减少背景干扰。
• 有效期：未稀释试剂在推荐条件下有效期 12 个月，复溶后建议一次用完。

适用场景

• 重组蛋白表达分析：快速检测细胞裂解液或上清中 His 标签蛋白的表达量。
• 蛋白纯化监控：评估亲和纯化过程中 His-tagged 蛋白的纯度和回收率。
• 高通量筛选：适合大规模样本中 His 标签蛋白的定量分析，如抗体药物开发、蛋白互作研究等。

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