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收藏1.产品介绍 MMC Large Scale 琼脂糖层析介质以高流速琼脂糖为基质,是一种多模式层析介质,同时 具有阳离子交换、疏水和氢键作用力,可在高盐条件下结合蛋白,样品无需稀释即可直接上样。 它具有高流速、高载量及良好的化学稳定性和物理性能,可以缩短生产周期,提高生产效率, 可用于高盐条件下蛋白质色谱纯化。

3.使用方法
3.1 装柱 装柱按照标准操作规程操作。必须保证每种材料都处于工作温度,凝胶装柱前需要脱气。 3.2 平衡 使用至少 5倍柱床体积的起始缓冲溶液平衡柱子,直至流出液的电导和 pH保持不变,起始缓冲液的 pH比目标蛋白的等电点低 0.5~2.0个 pH。 3.3 上样 样品用缓冲液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。 3.4 洗脱 用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。 3.5 再生 用高离子强度的溶液洗脱可逆性的结合物(如 2M NaCl的缓冲液),将 pH调至 10~11。使 用至少 5倍柱床体积的起始缓冲液冲洗,直至流出液的电导和 pH保持不变。 3.6 在位清洗 (1)对于以离子键结合的蛋白,可以用 0.5~2倍柱床体积的 2M NaCl反相冲洗 10~15min。 (2)对于沉淀蛋白、疏水性结合的蛋白或脂类,可用 1M NaOH ,流速 40cm/h反相冲洗 1~2h去除。 (3)对强疏水性结合的蛋白、脂类等,可用 2~4倍柱床体积的 70%乙醇或 30%异丙醇反 相清洗。但需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。 清洗完毕后需用至少 3倍柱床体积的平衡缓冲溶液平衡柱子,直至 pH和电导保持不变。 3.7 存储 密封贮存在 4~30℃(保存溶液为 20%乙醇),通风、干燥、清洁的地方,不能冷冻。用 过的柱子贮存在 4℃,20%乙醇溶液中。 3.8 运输 运输中避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
4. 注意事项 (1)样品必须澄清没有颗粒。(2)样品与层析介质必须用平衡缓冲液彻底平衡后,才能进行柱层析。 (3)所装的柱床必须表面平整,无沟流及气泡,否则应重装。 (4)洗脱过程中应严格控制流速,且勿过快。 (5)加样及整个洗脱过程中,严防柱面变干。 (6)本品应避免与氧化剂接触,避免长时间暴露在空气中。
