1. 产品介绍 Seplife® LXMS 30Q 是蓝晓科技自主研发的一款离子交换填料，以高交联的多孔聚苯乙烯/ 二乙烯苯（PS/DVB）单分散微球为基质，在微球表面键合了化学稳定性极高的亲水层。Seplife® LXMS 30Q 具有高流速、高分辨率、高载量、高刚性，良好的生物相容性和物理化学稳定性等 特点。与传统层析填料相比，显著提高了下游纯化工艺的生产效率和样品回收率，广泛应用于 抗体、蛋白质、多肽、核酸等生物分子的捕获、中度纯化、精细纯化。

3.使用方法 3.1 装柱 匀浆浓度等于静置胶体积除以除以匀浆后的总体积。采用 0.5M NaCl 匀浆可获得最佳装柱效 果，其浓度为 60%-70%。方法如下： 1)色谱柱的柱体积 V，V=Ac×L，Ac=π×r 2。 Ac：色谱柱横截面积；L:色谱柱高度；r：色谱柱半径。 2) 搅动介质形成匀浆液，量取所需质量或体积。其为柱体积的 1.2 倍左右，防止收缩。 3）用 0.5 M NaCl 溶液置换 20%乙醇，平衡过夜。 4）装柱之前，用 0.5 M NaCl 溶液调整匀浆浓度为 65 ~ 70%；将匀浆一次性倒入层析柱，沉 降平衡后标注高度。 5）将分配器装入，调节高度使得压缩系数为 1.05 ~ 1.10；然后启动输液泵，用 1.5~2 倍工 作流速使柱床稳定。 6）按照 SOP 进行柱效和对称性的测定，须达到预定标准。 3.2 柱效评价 装好之后，色谱柱用 3-5 体积超纯水清洗。100cm/h 流速平衡并进行柱效测试。 离子交换层析柱的柱效测试方法 样品： 2 M NaCl 溶液 上样量： 1~5 % 柱体积 洗脱液： 0.5 M NaCl 溶液 线性流速： 100 cm/h 检测： UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上样：电导检测仪 3.3 清洗 装好的色谱柱应使用至少使用 5BV 的去离子水清洗。 3.4 平衡 装柱后先用流动相平衡，5-10 个柱体积，流速控制 2-5cm/min，直到流穿的电导和 pH 保持不变方可进行上样。 3.5 上样 固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液尽量提前浓缩；高浓度样品溶液可用平衡 液稀释。同时为了避免堵塞层析柱，样品需要（离心或膜过滤）澄清处理。上样量根据介质的 载量和样品中目标蛋白的浓度估算，上样前请确保目标物缓冲液应尽可能与平衡液一致。 3.6 洗脱 上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线稳定，可以根据实际情况采取改变盐浓度或流动 相 pH 的方法依次洗脱吸附于层析介质上的样品。 3.7 再生清洗（CIP） 定期 CIP 清洗，可以防止柱床中蛋白质沉淀污染物的富集，有助于保持层析介质的载量、 分离效果。一般来说需要根据污染物类型为每个工艺设计特定的 CIP 清洗方法和 CIP 清洗的频 率。推荐 CIP 清洗方法如下：先用 5 BV 1-2 M 的 NaCl 淋洗，然后用 5 BV 0.5-1 M 的 NaOH 清洗。