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Eco57MI
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原料试剂 研发实验室
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品牌 Thermo Scientific
地区 -
货号 ER1671
产地 进口
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NA
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赛默飞
赛默飞中国
上海
赛默飞生命科学部门是赛默飞旗下增长迅速的部门之一，致力于为基础科研、生物制药领域提供技术领先的研究工具和解决方案。业务范围包括：细胞培养、细胞分析、分析生物学、蛋白质研究等众多领域。我们一直加强新技术新产品的开发，也积极倡导和践行跟客户协同合作，使新技术新产品能够第一时间服务于广大客户。
这里有赛默飞生命科学的明星产品，这里也是属于科研小伙伴们的“福利”补给站，定期产品优惠以及属于您的专属折扣价，更有满满干货课程资料，等你来探索。
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产品规格
图文详情
技术文档
产品规格
品牌名称
Thermo Scientific
货号
ER1671
国产/进口
进口
规格
NA
图文详情
|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | ||
| 10X Buffer B | 50X SAM | 10X Buffer Tango™ | ||||
| ER1671 | 50 u (1-3 u/µl) | 1.00 ml | 0.10 ml | 1.00 ml | ER1671 | |
Reaction conditions
| Recommended buffer for 100% activity | Optimal temperature | Enzyme activity in Fermentas buffers, % | Tango™ buffer for double digestion | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| B (blue) 1X |
G (green) 1X |
O (orange) 1X |
R (red) 1X |
Tango™ (yellow) 1X / 2X |
||||
| B +SAM | 37°C | 100 (+SAM) | 50-100 (+SAM) | 0-20 (+SAM) | 20-50 (+SAM) | 50-100 (+SAM) | 0-20 (+SAM) | 1X (+SAM) |
Lambda DNA
1.0%琼脂糖
65 切割位点
100%酶活性的反应条件
[1X 缓冲液B] + SAM：
[10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 0.1 mg/ml BSA] + 1 µM?�-腺苷甲硫氨酸。
37°C酶切。
[10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 0.1 mg/ml BSA] + 1 µM?�-腺苷甲硫氨酸。
37°C酶切。
保存缓冲液
Eco57MI保存在：
10 mM磷酸钾 (pH 7.4, 25°C), 100 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50%?�v/v)甘油。
10 mM磷酸钾 (pH 7.4, 25°C), 100 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50%?�v/v)甘油。
连接和重新酶切
10倍Eco57MI过量酶切后，大约90%的酶切产物可以连接，但是由于识别序列甲基化，连接产物不能重新酶切。
备注
- Eco57MI活性需Mg2+ 离子参与，S-腺苷甲硫氨酸可刺激Eco57MI酶活性。1 μM S-腺苷甲硫氨酸可将Eco57MI酶活性提升100倍。但是Eco57MI仍然很难完全切割某些底物DNA分子。
- Eco57MI浓度是底物DNA分子获得最大切割水平时对应的浓度，并且要保证此浓度不会改变酶切的带型。
- Eco57MI可能会吸附在切割的DNA分子上，改变DNA条带的电泳纯移率。为了避免出现非正常条带，上样电泳前，建议采用6X Loading Dye & SDS 溶液(#R1151)处理样本，或者在DNA 酶切产物中加入SDS并加热处理。 li>重叠的Dcm甲基化抑制Eco57MI酶切。为了避免Dcm甲基化的影响，样本DNA需要从dam-, dcm- 菌株中抽提，如GM2163 (#M0099)。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
双酶切
采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 可能重叠 – 阻止酶切。
CpG: 无重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
Dcm: 可能重叠 – 阻止酶切。
CpG: 无重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| Dcm (CCWGG) | 5'...Cm5CT GG AG...3' |
阻止酶切 |
| bp from the recognition site to fragment end | ||||
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 50-100 | ||||
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 65 | 3 | 2 | 6 | 3 | 3 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 3 | 3 | 4 | 3 | 2 | 6 |
技术文档
赛默飞mRNA疫苗整体解决方案.pdf65.19MB 查看资料
创新药出海白皮书.pdf7.99MB 查看资料
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化学药物分析整体解决方案.pdf8.44MB 查看资料
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中药分析完整解决方案.pdf4.02MB 查看资料
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赛默飞细胞与基因治疗整体解决方案.pdf4.61MB 查看资料
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赛默飞生物药解决方案概览.pdf5.4MB 查看资料
赛默飞抗体药物整体解决方案.pdf22.67MB 查看资料
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