说明
Lambda Exonuclease是一种具有高持续能力的5’=>3’外切脱氧核糖核酸酶,选择性切割双链DNA的5’-磷酸化链,见图1。该酶对单链DNA和未磷酸化DNA的活性较低、对含有切刻的DNA无活性、对有缺口的DNA活性有限(1, 2)。
来源
大肠杆菌细胞,含有Lambda噬菌体来源的克隆基因exo 。
分子量
26 kDa,单体。
活性单位定义
1个活性单位是指在37°C、30分钟内从双链底物中水解释放10 nmol酸性可溶反应产物所需的酶量。
酶活性分析混合物:67 mM glycine-KOH (pH 9.4), 2.5 mM MgCl2 , 0.1% (v/v) Triton X-100 和 20 µg/ml超声处理的E.coli [3 H]-DNA。
保存缓冲液
保存缓冲液组分:
25 mM Tris-HCl (pH 8.0), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50 mM NaCl, 0.1% (v/v) Triton X-100和50% (v/v)甘油。
10X 反应缓冲液
670 mM glycine-KOH (pH 9.4), 25 mM MgCl2 , 0.1% (v/v) Triton X-100。
质量控制
相关测试表明无内切脱氧核糖核酸酶污染。功能测试方法为以双链PCR产物为模板制备单链DNA。
抑制与失活
- 抑制剂:对-氯汞基苯甲酸盐,低盐浓度(0.2 M KCl, 0.1 M NaCl)。
- 失活:80°C加热15分钟。
Notice
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