说明
X-Gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galacto-pyranoside,5-溴-4-氯-3-吲哚-beta-D-半乳糖苷)是beta-半乳糖苷酶的惰性发色底物。beta-半乳糖苷酶降解X-Gal产生无色的半乳糖和4-chloro-3-brom-indigo,形成深蓝色沉淀。IPTG诱导
lacZ 基因表达,表达产物beta-半乳糖苷酶降解X-Gal并形成蓝色克隆(见下图)。
即用型X-Gal溶液不稳定,经0.22 μm膜过滤除菌。其与IPTG(#R1171)配套用于蓝/白克隆筛选实验。
质量控制
经HPLC检测,纯度超过98%。功能检测方法:蓝/白克隆筛选。
备注
- 推荐用二甲基甲酰胺或二甲基亚砜配制20 mg/ml的X-Gal储备液。二甲基甲酰胺会溶解某些塑料材料,因此需避免直接将含有二甲基甲酰胺的溶液加入到塑料培养皿中。
- 二甲基甲酰胺有毒,在琼脂糖平板上铺细菌时,必须等含有二甲基甲酰胺的X-Gal溶液完全风干后才能进行。
保存
X-Gal Solution, ready-to-use (#R0941)室温或4°C时,棕色管中可稳定保存至少12个月。
X-Gal (#R0401, #R0402, #R0404) -20°C黑暗保存。