产品简介

CD19分子是细胞表面糖蛋白，信号转导分子，参与调节B细胞发育、活化和增殖。与CD21、CD81组成一个大的信号转导分子，表达在B细胞及其前体上，是B细胞系列特异性抗原中早表达的标记。CD19正常表达见于B淋巴细胞；滤泡树突状细胞；正常浆细胞及其前体。异常表达见于大多数急性B淋巴细胞白血病/淋巴瘤，但在骨髓瘤细胞，T细胞和正常的粒细胞上无表达。本产品能够从新鲜或冻存的外周血单个核细胞中简便快捷的分选出较高纯度的CD19+ B细胞。能够处理的总细胞量为1×109，为基础和临床研究使用CD19+ B细胞提供一个有力的工具。

预期用途

适用于从人外周血、浓缩白细胞来源的单个核细胞等单细胞悬液中分选出CD19+ B细胞。

产品信息

试剂盒组成

保存方式

生物素化抗体、链霉亲和素磁珠及细胞分选缓冲液均置于2-8°C保存，有效期为12个月；生产日期，有效期至：见标签。

操作步骤

1、 单个核细胞的提取

分离外周血单个核细胞(推荐欣协生物快速单个核细胞分离管，货号91-01-0002),详细使用方法参见单个核细胞分离管说明书。

2、 CD19+ B细胞分离详细步骤（正选）

1. 往PBMC中加入适量（推荐每1×108cells使用50mL）预冷的细胞分选缓冲液用以洗涤PBMC，300g离心8min；

2. 弃上清，加入适量预冷的细胞分选缓冲液，将PBMC浓度调整为1×108cells/mL，冰浴或4°C预冷5min；

3. 以20μL生物素化抗体/mL PBMC的比例将生物素化抗体加入PBMC中，用移液枪轻柔吹打20次或涡旋震荡5S，充分混合后置于4°C孵育15min；

4. 孵育完毕后，加入细胞分选缓冲液，300g离心8min；

5. 弃上清，使用细胞分选缓冲液将PBMC浓度调整为108/mL；

6. 以50μL磁珠/mL PBMC的比例将链霉亲和素磁珠加入到PBMC中，用移液枪轻柔吹打20次混匀，室温静置孵育10min；

7. 孵育完毕后，加入2.5mL细胞分离缓冲液混匀后使用磁极磁吸3min去掉未被磁吸液体；

8. 重复步骤7一到两次；

9. 将收集细胞加入适量（推荐每1×108cells使用50mL）预冷的细胞分选缓冲液300g离心8min去上清，所得沉淀即为目的细胞即可用于下游分析及应用。