血管内皮生长因子（VascularEndothelial GrowthFactor，VEGF），是细胞内刺激血管生成的信号蛋白，具备促进血管新生和再生的功能。细胞内VEGF通过结合并活化细胞表面的血管内皮生长因子受体（VascularEndothelial GrowthFactor Receptor，VEGFR，又称酪氨酸激酶受体），最终导致血管生成。VEGFR有几种亚型：VEGFR1，VEGFR2，VEGFR3。VEGFR2（又称KDR）介导几乎所有已知的受体对VEGF的细胞应答。VEGF/VEGFR靶点抗体通过特异性的结合VEGF/VEGFR，从而抑制下游信号通路，实现抑制血管生成。单克隆抗体药物的生物学活性作为其关键质量属性在质控中备受关注，目前用于测定VEGF/VEGFR靶点抗体生物学活性的经典方法为HuVEC增殖抑制法，其工作细胞为原代细胞，实验周期长，变异性大且操作复杂，为了保证用药的安全性和时效性，满足质量检验的需求，急需建立一种简单，快速，精确的检测方法用于VEGF/VEGFR靶点抗体生物学活性检测。Rhinogen®VEGF Reporter Bioassay是一种生物发光报告基因检测方法，其作用机理（图1）基于VEGF与KDR的结合来刺激细胞应答。本系统采用工程改造的HEK293细胞作为测活细胞，该细胞株稳定表达VEGFR2以及由NF-κB应答元件驱动表达的萤火虫荧光素酶。当VEGF与测活细胞结合时，受体转导细胞内信号进而产生光；Anti -VEGF抗体或Anti -KDR抗体抑制VEGF与KDR结合会导致发光下降。 因此在一定浓度的VEGF存在的情况下，可检测不同阻断剂（如：Anti-VEGF抗体）对VEGF通路的影响。 Rhinogen®VEGF报告基因检测系统的各项特性使得其可作为针对VEGF靶点药物筛选及检测的有效手段。同时，该法可作为针对VEGF/VEGFR靶点药物的生物学活性常规检测方法及批签发检测指标。