【产品概述】

本试剂盒含有新一代逆转录酶和优化的缓冲体系，可以从极低量的总 RNA 或 poly(A) mRNA 合成第一链 cDNA，合成的 cDNA 产量高，也适用于 GC 含量高、二级结构复杂的 RNA 模板。与普通逆转录酶系统相比，具有逆转录能力强（合成较多全长 cDNA）、无 RNase H 活性、热稳定性高和半衰期长等优点。试剂含有反转录反应所需的全部试剂（Cofitt Plus Reverse Transcriptase，RNase Inhibitor，Oligo(dT)20/Random N6，dNTPs）。本制品含有去基因组成分新型 dsDNase，能够特异性去除双链 DNA，而不消化 RNA 样品、逆转录引物及合成的 cDNA，并且具有热敏感性，可在 55℃快速地不可逆失活，实现去除基因组污染与逆转录反应的同步进行。合成的第一链 cDNA 能直接用于 PCR 或荧光定量 PCR 的模板，第二链 cDNA 的合成或线性 RNA 扩增，也可用于需要用带有放射性或非放射性核苷酸标记第一链 cDNA 的实验。

【产品特点】

1、所有模板和组分只经历一次混合，即可反应，无需中途再添加，操作简便；

2、热稳定性高，反应温度 42-55℃，有助于 RNA 二级结构打开，大幅提高热稳定性和 cDNA 合成效率；
3、无 RNase H 活性，可避免第一链 cDNA 合成过程中，RNA/DNA 杂交模板链中 RNA 降解，保证 cDNA 合成的质量；
4、Random N6 和 Oligo(dT)20 引物比例经过优化，可均匀合成样品中的 cDNA；
5、含有去基因组成分，反转录时可同步去除基因组 DNA 污染，无需单独添加，方便快捷；

6、合成片段≤15 kb。

【产品组分】

*1: 包含 Buffer、dNTPs、Random Hexamer Primer/Oligo (dT)20 Primer mix

*2: 包含 ExonScript Reverse Transcriptase、Ribonuclease Inhibitor 和 dsDNase

【注意事项】

1、请使用高质量的 RNA 模板进行试验，1~2 μg RNA 反转后大约能得到 0.7-1.5 μg cDNA，建议稀释 3 ~ 5 倍后使用。

2、使用之前请将试剂完全溶解并充分混匀，以防因盐离子浓度不均影响实验结果。

3、以 RNA 为模板获得全长的第一链 cDNA，其起始位点由所用引物所决定：
    a. 随机引物(Random Primer)在 RNA 模板上没有特异性结合位点，所有 RNA 都可以做为第一链 cDNA 合成的模板；

    b. Oligo dT Primer 只能以 poly(A) mRNA 作为 cDNA 合成的模板；

    c. 采用序列特异性引物(Gene Specific Primer)以其结合位点为起始位点。

4、合成的第一链 cDNA 产物可直接加入 PCR 反应混合物中进行扩增，但加入体积不应超过 PCR 反应总体系的 10%，否则可能影响目的片段的产量。