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牛痘病毒加帽体系利用牛痘病毒加帽酶及相关组分,将7-甲基鸟苷帽结构(m7Gppp,Cap0)加到 RNA 的 5´ 末端。在真核生物中,该结构与mRNA的稳定、转运和翻译密切相关。使用酶促反应为RNA加帽是一种简单有效的方法,且帽结构与天然Cap 0结构完全一致,能显著改善用于体外转录、转染和显微注射的RNA的稳定性和翻译能力。这种酶由两个亚基(D1 和 D12)组成 (图 1a),兼具RNA三磷酸酯酶活性、鸟苷酰基转移酶活性和鸟嘌呤甲基转移酶活性,它们对于添加一个完全的Cap0结构都是必须的。本体系可用于IVT RNA的加帽反应,使加帽反应在1h之内完成,效率接近100%,并且保证正确的方向。IVT推荐使用近岸蛋白质T7 High Yield RNA Transcription kit(目录号:E131)。