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本制品适用于qPCR荧光定量法检测DNA的甲基化。在该产品中添加了经过特殊工艺处理的新型Taq DNA聚合酶、Mg2+、 dNTPs、PCR稳定剂和增强剂等,组成一种2×浓度的预混型试剂,适用于检测经亚硫酸盐转化后的DNA模板,对其进行定量或半定量的甲基化分析。经过优化,本制品具有多重扩增能力,灵敏度高,可检测弱阳样本,同时荧光信号值高。
Methylight分析原理:亚硫酸氢盐处理DNA模板后,甲基化的CpG序列仍然保持CpG序列形式,未甲基化的CpG序列会转变为UpG序列。然后针对CpG和UpG所在的片段设计两对引物,进行qPCR,通过比对Ct值来确定甲基化水平。或者,只设计一对针对甲基化CpG片段的引物进行半定量分析。