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研究证明,Cap 0-和Cap 1-mRNA之间的差异在RNA 5'端第一位核苷酸(N1)是否具有2'-O-甲基,在高等真核细胞中,该甲基化是天然加帽过程的一部分,Cap 1结构提高了mRNA的翻译效率。mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase能在 RNA 5´末端紧邻帽结构的第一个核苷酸的2´-O上添加甲基基团,利用S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体,使带帽Cap 0甲基化为Cap 1。该酶只能以带7-甲基鸟苷帽结构(m7GpppN)的RNA为底物,不会作用于5´末端为pN、ppN、pppN或GpppN的RNA。带7-甲基鸟苷帽结构(m7GpppN)的RNA可通过近岸蛋白质Vaccinia Capping System(货号: M062)获得。
本体系可用于IVT RNA的加帽反应,使加帽反应在1h之内完成,效率接近100%。IVT推荐使用近岸蛋白质T7 High Yield RNA Transcription kit(货号:E131)。