【产品名称】

羊水细胞培养基

【产品参数】

◆外观：红色透明液体

◆pH值：6.8 -7.4

◆渗透压：280-320 mOsm/kg·H2O

◆内毒素：≤1 EU/mL

【产品简介】

羊水细胞培养基专用于羊水细胞的增殖培养，不具备对细胞的选择、诱导、分化功能。培养后的细胞用于核型分析和其它产前基因检测。

【产品特点】

◆1X即用型培养基，无需额外添加其它成分

◆细胞贴壁效果好，增殖速率快

◆培养周期短，分裂中期细胞数量多

【使用说明】

1、2-8°C解冻，轻轻旋转混匀，确保混合均匀后使用。切勿在37°C解冻，可能产生沉淀影响使用效果。

1. 解冻后可根据实验室使用习惯或频率进行小包装分装，贮存于-20°C，避免反复冻融。已解冻的羊水细胞培养基可在2-8°C保存10天。
2. 为保证最佳的细胞增殖效果，请在开瓶后7-10天内使用完。

【使用方法】

1、无菌条件下取羊水2ml/管，1000rpm，10min离心分离细胞。弃上清，每管约留0.5mL重悬细胞，再加入4.5mL羊水培养基轻轻混匀，转移至T25细胞培养瓶中，置于37°C，5% CO2培养箱中培养。

1. 观察细胞生长，可见成纤维样或上皮细胞生长，当细胞生长旺盛，在贴壁细胞层的背景上出现圆形细胞时，更换5mL新鲜羊水细胞培养基。
2. 24-48h后，若细胞生长良好，加入秋水仙素0.04-0.08µg/mL(20µg/mL，7号针头垂直竖加2滴)，4-6h后进行细胞学处理。
3. 将T25培养瓶中细胞液转移至10mL离心管中，用0.85% Nacl溶液冲洗细胞壁两遍，0.25%胰酶消化3-5min，当细胞面出现肉眼可见皱形改变时即用吸管吹打下细胞，离心（1000rpm，10min）弃上清，约留0.5mL。
4. 低渗：加入37°C预温的0.075M KCl溶液4-6mL轻轻混匀，37°C水浴3-5min。
5. 预固定：加入1.5mL固定剂（甲醇：冰醋酸=3:1）轻轻混匀，37°C水浴5min，离心（1000rpm，10min）弃上清，约留0.5mL。
6. 固定：加入8mL固定剂（甲醇：冰醋酸=3:1）轻轻混匀，37°C水浴10min，离心（1000rpm，10min）弃上清，约留0.5mL。
7. 重复固定：加入8mL固定剂（甲醇：冰醋酸=3:1）轻轻混匀，37°C水浴10min，离心（1000rpm，10min）弃上清，视管底细胞量适当加入几滴固定剂。
8. 制片：每片玻片滴2-3滴,75°C烤箱烘烤3h。

【保存方法和使用期限】

◆保存方法：-20°C，避光存放。

◆使用期限：有效期1年。

【注意事项】

◆本产品经过滤除菌，使用时应注意无菌操作，避免污染。

◆部分内容物如谷氨酰胺等易降解，请勿保存时间过长，尽早使用。

◆本产品可用于科研、体外辅助诊断。不可用于临床治疗等领域。