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CM-H2DCFDA是H2DCFDA的氯甲基衍生物(Chloromethyl derivative),也称CM-DCFH-DA,其在活细胞中比H2DCFDA具有更好的滞留率,因此荧光信号更强,且更适合细胞内活性氧的相对较长时间的研究。CM-H2DCFDA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成CM-H2DCF (也可称为CM-DCFH)。而CM-H2DCF不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。CM-H2DCF的氯甲基可与细胞内谷胱甘肽或其它巯基发生反应从而具有更好的细胞内滞留性,后续细胞内的活性氧可以氧化无荧光的CM-H2DCF生成有荧光的CM-DCF,检测CM-DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。
本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂Rosup,以便于活性氧的检测。Rosup是一种混合物(Compound mixture),浓度为50mg/ml。
本试剂盒 6孔板每孔检测体系的体积为1ml时,可以检测20次;96孔板每孔检测体系为100μl时,可以检测200次。如果用于流式细胞仪,每个样品检测体系体积为0.5ml时,可以检测40次。