是结合富含A-T碱基对DNA序列的荧光染料。DAPI是一种能够与DNA中大部分A，T碱基相互结合的荧光染料﹐常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜﹐它可以用于活细胞和固定细胞的染色。当DAPI与双链DNA结合时，最大吸收波长为358nm，最大发射波长为461nm。DAPI的发射光为蓝色，且DAPI和绿色荧光蛋白GFP或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发射波长仅有少部分重叠，可以利用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。一般的，用于细胞核染色时，推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/mL。注意事项:1)DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。2)荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。3)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。4)一般的，DAPI常用于固定细胞或组织切片染核；活细胞细胞核的观察更推荐使用Hoechst 33342或Hoechst 33258。使用方法（仅供参考）：1.固定的细胞或组织染色：对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI染色。a)对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。 对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。b)吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm。2.活细胞或组织染色：a)细胞培养物中加入适量DAPI染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1mL染色液，对于96孔板一个孔需加入100μL染色液。b)在37℃培养细胞10～20分钟。c)用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360nm，发射波长460nm。In Vitrocell(The mouse breast cancer cell lines (EMT6 and 4T1) and mouse mammary epithelial cells (HC11), counterstained with 4′,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) (Solarbio, Beijing, China) for 15 min )Cells were washed in PBS, followed by incubation with Alexa Fluor? 568 goat anti-rabbit at room temperature (RT) for 1h and counterstained with 4′,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) (Solarbio, Beijing, China) for 15 min.来源文献:Pan T, Peng L, Dong J, Li L. Pterostilbene Induces Pyroptosis in Breast Cancer Cells through Pyruvate Kinase 2/Caspase-8/Gasdermin C Signaling Pathway. Int J Mol Sci. 2024 Sep 29;25(19):10509. doi: 10.3390/ijms251910509. PMID: 39408842; PMCID: PMC11476961.Cell（CT26 cells，5 min）CT26cells were further incubated with Alexa Fluor 488-conjugated secondaryantibody for 2 h. Finally, the cells were stained with DAPI for 5 min andobserved on CLSM.来源文献：Xin Y, Yu Y, Wu M, Su M, Elsabahy M, Qu X, Gao H. Tumor and intratumoral pathogen cascade-targeting photothermal nanotherapeutics for boosted immunotherapy of colorectal cancer. J Control Release. 2025 Mar 10;379:574-591. doi: 10.1016/j.jconrel.2025.01.048. Epub 2025 Jan 24. PMID: 39832745.