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产品描述/Products Description
CCK8主要应用于细胞活力增殖和毒性检测，购买此试剂盒需自备96孔板，10 u、100-200 ul以及多通道移液器，带有450 nm滤光片的酶标仪，CO2培养箱。
试剂规格：1ml/100T
细胞活性检测
- 在96孔板中接种细胞悬液(100 /)。将培养板放在培养箱预培养(在37C，5% CO2的条件下)。
- 向每孔加入10u的CCK- 8溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响O.D值的读数)
- 将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
- 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
如果暂时不测定O.D值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10 ul01 M HCI溶液或者1% w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下在24小时内吸光度不会发生变化。
细胞增殖-毒性检测
1.在96板中配制100的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37C，5% CO的条件下)2.向培养板加入10 l不同浓度的待测物质。
3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:612,24或48小时)。
4.向每孔加入10 CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响O.D值的读数)。
5.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
6.用酶标仪测定在450 nm处的吸光度
7.如果暂时不测定O.D值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10 ul 0.1 M HCI溶液者1% w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下在24小时内吸光度不会发生变化。注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK-8之前更换新鲜培养基，去掉药物的影响。当然药物影响比较小的情况可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
制作标准曲线
1.先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。
2按比例(例如:1/2比例) 依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔
3.接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定O.D值，制作出一条以细胞数量为横坐标 (X轴)，O.D值为纵坐标(Y轴) 的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提条件是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间)
声明：产品仅供科研使用
