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收藏mRNA Cap 2氧甲基转移酶(mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase)是一种来自于牛痘病毒的重组蛋白。该酶可以在RNA的5´末端紧挨帽结构的第一个核苷酸的2´-O位置处添加一个甲基基团。该酶利用SAM作为甲基供体来甲基化加帽RNA,从而形成Cap1结构。Cap1结构能增强mRNA的翻译效率,因此可有助于改善mRNA转染和显微注射实验中的表达。该酶需要有m7GpppN即7-甲基鸟苷帽结构的RNA作为底物。
产品性质
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。推荐分装冻存,避免反复冻融。
产品组分
使用方法
1、使用RNase-free 水将适量 Capped RNA 稀释至16 μL;
2、将稀释的RNA 在65℃条件下加热处理5 min,反应后冰上放置 5 min;
3、按下表(1)配置反应体系(适用于10 μg以内Capped RNA的甲基化反应);
4、37℃条件下孵育1 h(对与目的片段长度小于200 nt RNA,可将孵育时间增加到2 h);
表1:20μL反应体系配置
注意事项
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、用于实验反应的RNA在用之前应进行纯化处理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和盐离子;
3、反应之前推荐65℃加热5 min以去除RNA的二级结构。如果转录产物的5´端结构复杂,可将时间延长至10 min;
4、本产品仅作科研用途!
HB220224