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收藏产品简介:
中科百抗mRNA专用转染试剂(PolyTool™ mRNA Transfection Reagent)专用于贴壁或悬浮细胞株的mRNA递送,直接将mRNA传递到细胞质中表达,可以避免转录调控作用,避免进入细胞核的限制,促进短期内蛋白的表达。
产品属性:
规格:300 μL/1 mL/5mL
保存与运输:常温运输,放置于 2-8℃保存,保质期为 1 年。
产品特点:
不换液,更轻松:转染前无需换液,减少污染风险;
血清无影响,更高效:转染效果不受培养基中血清影响,更高效;
毒性低,更有活力:对细胞的毒性低,转染后对细胞活力影响极小,细胞更有活力;
操作简单,更省心:本转染试剂只需4步即可完转染,省时省力更省心。
实验流程:
1、准备待转染细胞(以六孔板为例)
转染前,将胰酶消化后的贴壁细胞按照每孔1.5-2×105个细胞进行接种,使其在转染时密度为70-90%;(其他培养板的加样体积参考表一:转染参考表)
表一 转染参考表
| 细胞培养板 | 培养体系 | 贴壁细胞数/孔 | Opti-MEM培养基体积(μL) | mRNA量(μg) | 转染试剂体积(μL) |
| 96孔板 | 0.1 | 0.8-1.2×104 | 10 | 0.1-0.2 | 0.25-0.5 |
| 24孔板 | 0.5 | 3.5-5×104 | 50 | 0.5-1 | 1.25-2.5 |
| 12孔板 | 1 | 0.8-1×105 | 100 | 1-2 | 2.5-5 |
| 6孔板 | 2 | 1.5-2×105 | 200 | 2-4 | 5-10 |
| 60mm | 5 | \ | 500 | 4-8 | 10-20 |
| 100mm | 10 | \ | 1000 | 10-20 | 25-50 |
2、细胞转染
(1)使用中科百抗mRNA专用转染试剂(BM350102)前涡旋5 秒,然后取 5-10 μL 转染试剂添加至 200 μL opti-MEM 培养基的无菌 EP 管中,吹打混匀;
(2)向(1)溶液中添加 2-4 μg mRNA(建议 mRNA 浓度配制为 0.1 μg/μL),吹打混匀;
(3)将(2)所述溶液室温静置 10~15 分钟;
(4)将(3)所述溶液加入1所述的六孔板的一个孔中,根据孔量进行配制母液)
3、检测转染基因表达
37℃培养18-24小时后检测基因表达。