Western Blot（蛋白质免疫印迹法）是一种通过特异性抗体检测目标蛋白质表达水平及特异性的经典技术。其核心原理是​​利用电泳分离蛋白质样品，转膜后通过抗体-抗原特异性结合，结合化学发光或荧光信号检测，实现目标蛋白的定性与半定量分析​​。广泛应用于蛋白表达验证、信号通路研究、抗体特异性验证等领域。

实验流程

佐润生物采用标准化WB流程，确保结果可靠性和可重复性：

1. 蛋白提取与定量​​

• 提取样本总蛋白，BCA/Lowry法精确测定浓度，确保上样量均一。

2. SDS-PAGE凝胶电泳​​

• 按蛋白分子量大小进行分离，形成清晰的条带。

3. 转膜（Western Blotting）​​

• 通过湿转或半干转将凝胶中分离的蛋白转移至PVDF/NC膜，保留蛋白空间构象。

4. 封闭与抗体孵育​​

• 使用脱脂奶粉或BSA封闭膜蛋白非特异性结合位点；
• 一抗孵育：特异性识别目标蛋白；
•  二抗孵育：HRP标记的二抗结合一抗，放大检测信号。

5. 化学发光/荧光检测​​

• 化学发光法（ECL）结合X光胶片或化学发光成像仪捕捉信号，灰度分析实现半定量；
• 荧光标记抗体可直接通过荧光成像系统检测，灵敏度更高。

佐润生物WB服务优势 ​​

专业高效，省心无忧​​

• 客户只需提供：样本（细胞/组织/蛋白裂解液）、目标蛋白抗体（或由我方推荐）、实验背景信息。
• 全程技术支持：从蛋白提取、电泳转膜到抗体孵育、数据分析，均由资深实验团队完成。  ​​

结果真实，权威保障

• 高灵敏度检测：可检测低至1 ng目标蛋白，支持低丰度蛋白分析；
• 严格质控体系：设置内参对照（如GAPDH/β-Actin），确保实验重复性；
• 客观数据呈现：提供原始胶图、灰度分析图及完整实验报告，拒绝数据修饰。  ​​

技术灵活，应用广泛​​

• 支持多种样本类型（哺乳动物细胞、植物、微生物等）；
• 可检测总蛋白、磷酸化蛋白、剪切体等特殊修饰蛋白；
• 兼容化学发光（ECL）与荧光检测双模式，满足不同需求。  ​​

经验丰富，值得信赖​​

• 累计完成超10万次WB检测，覆盖肿瘤研究、神经科学、药物开发等领域；
• 提供中英文双语报告，支持学术论文发表及专利申报。