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收藏酪酰胺信号放大(Tyramide signal amplification, TSA)技术是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白进行高密度原位标记的酶学检测方法。其原理是利用酪胺的过氧化物酶反应,酪胺荧光素底物在HRP和过氧化氢的作用下被活化,产生的活化荧光底物能与目标蛋白的蛋白残基(酪氨酸残基)共价结合,导致在抗原-抗体结合位点大量沉积荧光素,实现信号放大。通过热修复处理,将前一轮非共价结合的抗体洗掉,而荧光素稳定结合在蛋白上,进行下一轮染色。直至所有抗体孵育结束,进行核染色,封片,扫描。
由于每次体系中都只有单一抗体孵育,因此无需担心抗体交叉反应及一抗二抗种属匹配问题,摆脱了传统免疫荧光实验条件对抗体种属来源的限制和束缚。此试剂盒中的修复/速除二合一缓冲液效果远胜普通修复液,显著杜绝“串染”、“过修复”现象;快速反应缓冲液使反应体系不依赖H2O2,将反应时间从5-20 min缩短至10 sec-10 min;水晶封片剂使用抑制气泡配方及吸取式滴瓶,有效防止封片过程产生泡,增强型防淬灭配方,使TSA荧光可保存6个月-2年。实验所需试剂一站式配齐,有效的缩短了操作时间,简化了繁琐的操作步骤。