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Control, KD=5.97E-10M现有的单克隆抗体开发技术，比如杂交瘤技术由于细胞融合效率造成多样性的损失，文库展示技术产生抗体的重轻链不是天然配对，这些原因使得传统技术在抗体开发上效率低而且周期较长。
Beacon®单细胞光导系统将独有的光电定位技术与新颖的微流控设计结合，可以在一张芯片上精准地对单细胞进行挑选，对单细胞进行多种实验，并根据实验时读取的特定结果导出目标细胞。Beacon®光导平台能更好地保留B细胞的多样性，在发现早期阶段即可得到高质量的阳性hits，避免“优秀克隆”的丢失。
1天 1天内完成所有B细胞筛选 | 35天 最快35天获得阳性克隆 |
>10000个 一次筛选10000个以上的B细胞 | 3~4轮 3~4轮介入筛选 |
Beacon®单B细胞抗体发现的技术路线
义翘神州的Beacon®单B细胞分选平台，自动筛选上万个浆细胞，将传统杂交瘤技术需要1-2个月的筛选工作，缩短至仅需1天完成。整个筛选过程对细胞无损伤，最大程度保证细胞的活性。结合快速免疫小鼠方案，义翘神州最快35天获得阳性单克隆抗体，从而加速抗体药物发现的进程。除了开发鼠单抗之外，义翘神州利用此平台也成功开发了兔单克隆抗体。另外，义翘神州也提供小鼠单抗人源化服务，经过2次3D结构建模，最终交付人源化程度超过95%的单克隆抗体。
Beacon® B细胞抗体制备服务内容
周期：最快35天
抗原复核（1-2天）：UV及SDS-PAGE分析
动物免疫（2-11周 ）：多轮免疫；ELISA结合效价检测；流式细胞学效价检测（可选）
Beacon分选（1天 ）：基于抗原特异结合检测；基于细胞的抗原特异结合检测（可选）；种属间交叉检测（可选）；配体阻断试验（可选）
载体构建（1-2周 ）：对单细胞抗体进行测序；抗体基因扩增及载体构建
抗体表达及鉴定（2-3周 ）：重组表达；蛋白A纯化抗体；SDS-PAGE及UV分析；ELISA鉴定；SPR/BLI亲和力测定（可选）；流式检测（可选）；细胞活性测定（可选）
| 交付内容： | • 阳性克隆纯化抗体 • 含有抗体重链、轻链的商业载体及基因序列 • 质量检验报告 (CoA) |
| 注意： | • 小鼠快速免疫2-3周，常规免疫7~11周；兔子快速免疫5-6周，常规免疫8-10周。 • 客户可提供抗原或选择义翘神州抗原制备服务。 |
Beacon®抗体开发服务套餐一览
鼠单B细胞Beacon®筛选服务
| 抗独特型鼠单抗Beacon®筛选服务
|
兔单B细胞Beacon®筛选服务
| 抗体药物开发服务
|
Beacon®筛选CD47候选抗体的案例分享
CD47是一个热门的药物靶点，不仅在癌细胞上过表达，还广泛表达于正常细胞，如红细胞。义翘神州通过Beacon®单细胞光导平台筛选到多株与蛋白和肿瘤细胞均有结合的CD47抗体。在阻断实验中，CD47抗体可以有效阻断CD47与其配体信号调节蛋白α （SIRPα）的结合。在BLI亲和力测定实验中，这些抗体与对照抗体的亲和力水平相当，都达到了纳摩尔或亚纳摩尔的水平。在细胞结合实验中，CD47抗体与肿瘤细胞（Jurkat细胞）有结合，且与红细胞表面的CD47仅在高浓度下有弱结合，与对照抗体的结果相近。
阻断实验  | Jurkat细胞结合实验
 |
红细胞结合实验  |
BLI亲和力测定实验
Control, KD=5.97E-10M  | CD47-M0002-1, KD=3.68E-10M  | CD47-M0065, KD=1.11E-09M  | CD47-M0137-1, KD=5.59E-10M  |
CD47-M0091-1, KD=4.52E-10M  | CD47-M0075-1, KD=1.44E-09M  | CD47-M0120, KD=1.60E-09M  | CD47-M0126-2, KD=6.90E-10M  |
Beacon®平台的常见问题解答
Beacon®分选的细胞和流式分选的细胞有什么区别吗？
Beacon®分选的是B细胞分化到终末阶段的浆细胞，流式分选的是抗体在膜表面的记忆B细胞。
Beacon®最多一次可导入多少个B细胞？
Beacon®芯片的规格不等，每张芯片可导入7000~20000个B细胞，可同时导入4张芯片。
在Beacon®上可做哪些抗体筛选检测？
可以做的抗体筛选检测包括IgG分泌、配体受体竞争、多种属交叉和报告细胞实验等。
