碧云天生产的BeyoFast™系列快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在5-15分钟内仅使用一种缓冲液就能快速完成DNA酶切的高品质限制性内切酶。

BeyoFast™系列快速内切酶适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。

BeyoFast™系列快速内切酶具有如下优点。(1) 5-15分钟内就能完成酶切；(2) 所有BeyoFast™系列内切酶共用一种酶切缓冲液CutEZ™ Buffer，大大简化酶切反应体系，方便进行双酶切或多酶切；(3) 针对不同酶在CutEZ™ Buffer中活性存在差异的问题，调整了不同酶的浓度，可以统一按照每20μl体系加入1μl酶量的用量进行酶切反应；(4) Alkaline Phosphatase、Antarctic Phosphatase、T4 DNA Ligase、T4 Polynucleotide Kinase、T4 PNK (3' phosphatase minus)等很多修饰酶等都100%兼容CutEZ™ Buffer (具体的兼容性表请参考https://www.beyotime.com/product/D6018.htm)，使“酶切-连接”和“酶切-修饰-连接”等反应体系可以兼容，支持一管化反应；(5) 良好的酶活冗余度，轻松应对底物过量或困难模板酶切。

酶活性检测：最适反应温度下，在20μl反应体系中，1μl BeyoFast™ HindIII能够在15min内完全消化1μg含有单个HindIII酶切位点的质粒。

图1.碧云天生产的BeyoFast™ HindIII (D5737)酶活性实测效果图。20μl反应体系中包含1μg pUC18 (D2303) (2686bp)，以及如图所示不添加或添加1µl BeyoFast™ HindIII，分别使用1X CutEZ™ Buffer和1X Easy-Load™ CutEZ™ Buffer，37ºC孵育15分钟进行酶切反应，80ºC孵育20分钟进行失活，然后电泳并使用NA-Red (EB升级换代产品, 2000X) (D0128/D0130)进行核酸染色，再进行荧光成像分析。所使用的DNA marker为DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands) (D0110)。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。

长时间酶切检测：最适反应温度下，将1μl BeyoFast™ HindIII与1μg λDNA共同温育3h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，延时酶切可能出现星号活性。

酶切-连接-再酶切检测：最适反应温度下，使用1μl BeyoFast™ HindIII消化底物，回收酶切产物，在22℃下使用适量T4 DNA Ligase可以将酶切产物重新连接，将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。

非特异性内切酶活性检测：最适反应温度下，将1μl BeyoFast™ HindIII与1μg超螺旋质粒DNA共同温育4h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，质粒DNA仍然处于超螺旋状态。

蓝白斑检测：将含有单一lacZα基因的载体以1μl BeyoFast™ HindIII消化，重新连接后转化入大肠杆菌感受态细胞，涂布在含有对应抗生素、IPTG和X-gal的LB培养基平板上。连接正确的产物会生长出蓝色菌落，而连接错误(即DNA末端切口不完整)的产物将得到白色菌落。对于BeyoFast™系列限制酶而言，白色菌落比例应小于1%。

BeyoFast™ HindIII快速内切酶基本信息如下：

BeyoFast™ HindIII快速内切酶在不同反应缓冲液中的活性(缓冲液兼容性)如下:

注：活性数据来自碧云天BeyoFast™系列快速内切酶的标准反应体系下的检测。

BeyoFast™ HindIII快速内切酶识别位点的甲基化影响请参考下表：

包装清单：

保存条件：

-20ºC保存，两年有效。

注意事项：

内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。

不含核酸酶的超纯水推荐选购碧云天的ST876 BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile)。

如果发现预期的酶切位点不能切开，请确认是否存在甲基化干扰问题。

同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性，遇到可能存在甲基化干扰问题时，可以尝试同裂酶。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。