B6J.Rag1 KO是一种通过CRISPR/Cas9技术构建的重组激活基因1位点等位基因敲除品系，该品系携带3527-nt缺失，由杰克森实验室罕见病和孤儿病研究中心开发。这些小鼠可用于研究 B 细胞和 T 细胞缺失以及异种移植/移植。

该同基因突变品系是B6.129S7-Rag1tm1Mom/J同源品系（货号 002216）的替代品系。

品系详情

B6J.Rag1 KO等位基因的敲除，是通过CRISPR/Cas9核酸内切酶对重组激活1基因 (Rag1) 第二个外显子 基因组进行编辑，以获得3527-nt缺失的突变（AGTATAAGTGTCCCCAAAT//3527 缺失//GGTCAGGGATCGATAGTTGACAAG）。这种基因编辑设计方式创建的纯合子等位基因基础，可对该纯合子成熟T细胞或B细胞带来很大程度或彻底的生产障碍。

2021年6月，杰克森实验室对B6J.Rag1 KO纯合子小鼠的分析 (N=12)显示：循环T淋巴细胞群完全被消除，循环中仅检测到1-2%残留的CD19+B细胞群。 这些结果与品系 002216在同一研究中观察到的结果没有显著差异。

杂合子小鼠与纯合子小鼠均可存活且可正常繁育。

Rag1基因编码的蛋白是参与V(D)J重排的RAG复合物的一部分。该基因的突变与Omenn综合征、伴随γ/δ T细胞扩增引起的α/β T细胞淋巴细胞减少、重度巨细胞病毒感染、自身免疫、肉芽肿和重度联合免疫缺陷有关的体液和细胞免疫联合缺陷，B细胞阴性有关。

品系建立

B6J.Rag1 KO等位基因敲除是在杰克森实验室罕见病和孤儿病研究中心使用 CRISPR/Cas9核酸内切酶介导的基因组编辑产生的。 选择向导RNA [AAGTGTCCCCAAATATTGTC；GCACCTAGCACATTGCCATG] 靶向2号染色体上重组激活基因1 (Rag1) 第二个外显子 侧翼的内含子DNA。未使用寡核苷酸供体序列。 将这些向导和 Cas9 核酸酶导入单细胞C57BL/6J受精卵，并转移到假孕的雌鼠中。 靶向区域的 DNA 测序确定了1只雄鼠（首建鼠5410）携带3527-nt缺失（AGTATAAGTGTCCCCAAAT//3527 缺失//GGTCAGGGATCGATAGTTGACAAG），该片段的缺失导致基因组中的第二个外显子被敲除丢失。将这只首建雄鼠与C57BL/6J小鼠（品系货号 000664）交配进行种系传递。 在杂交之前，将其与C57BL/6J交配繁殖至少两代，以建立纯合突变体 B6.Rag1 KO鼠群。