已关闭
收藏| 用途 |
| CFKIT02为无细胞蛋白表达系统,以大肠杆菌细胞裂解物为基础,并辅以体外高效转录和翻译所需的所有酶、能量再生系统和缓冲环境,用户仅需要提供质粒或PCR产物模板,即可在数小时内获得可溶蛋白。 |
| 产品特色 |
| 1. 高效筛选,加速研发:专为抗体药物候选分子(如 VHH、scFv)及 ≥40aa 短肽的快速表达与鉴定设计,大幅缩短筛选周期,提升研发效率。 2. 模板兼容性广:支持质粒DNA与 线性DNA(PCR产物)作为表达模板,满足不同实验阶段的灵活需求。 3. 二硫键蛋白友好表达:针对含复杂二硫键的目标蛋白,本产品无需额外添加增强剂,体系中的专属蛋白质及缓冲液组分即可有效辅助蛋白正确折叠,确保表达产物的生物活性与结构完整性。 4. 系统性能可靠:基于经过优化的大肠杆菌裂解物体系,历经大量内部实验及服务项目验证,确保蛋白表达的成功率与稳定性。 5. 工业级供应能力:可提供 Bulk 规格定制,无缝对接工业级高通量筛选需求,助力规模化生产应用。 |
| 储存条件 |
| 收到后请立即按照说明书分类保存(-80℃及-20℃),避免反复冻融。 |
| 运输方式 |
| 干冰 |
试剂盒组成
CFKIT02-50
| 组分 | 组分描述 | 数量 | 储存温度 |
| Buffer 1A | 原料系统 | 1 | -80℃ |
| Buffer 1B | 能量系统 | 1 | -80℃ |
| Buffer 2A | 大肠杆菌裂解液 | 1 | -80℃ |
| Buffer 2B | 大肠杆菌裂解液 | 1 | -80℃ |
| Buffer 3 | 经优化的原料系统缓冲液 | 1 | -20℃ |
| Buffer 4 | 经优化的原料系统缓冲液 | 1 | -20℃ |
| Buffer 5 | 经优化的原料系统缓冲液 | 1 | -20℃ |
| Control sfGFP Plasmid | 阳性对照质粒 | 1*100 μg | -20℃ |
CFKIT02-1000
| 组分 | 组分描述 | 数量 | 储存温度 |
| Buffer 1A | 原料系统 | 1 | -80℃ |
| Buffer 1B | 能量系统 | 1 | -80℃ |
| Buffer 2A | 大肠杆菌裂解液 | 1 | -80℃ |
| Buffer 2B | 大肠杆菌裂解液 | 1 | -80℃ |
| Buffer 3 | 经优化的原料系统缓冲液 | 1 | -20℃ |
| Buffer 4 | 经优化的原料系统缓冲液 | 1 | -20℃ |
| Buffer 5 | 经优化的原料系统缓冲液 | 1 | -20℃ |
| Control sfGFP Plasmid | 阳性对照质粒 | 1*400 μg | -20℃ |
反应体系
100μL标准反应体系
| 加入顺序 | 组分 | 体积 (100 μL体系) |
| 1 | 预处理后Buffer 2B | 35.0 μL |
| 2 | Buffer 1A | 7.3 μL |
| 3 | Buffer 1B | 7 μL |
| 4 | Buffer 2A | 10.0 μL |
| 5 | Buffer 3 | 1.0 μL |
| 6 | Buffer 4 | 4.0 μL |
| 7 | 模板质粒DNA | 终浓度 30 ng/μL |
| 8 | 无核酸酶水 | 20.7 μL |
若需配置非标准反应体系,所有组分按照100μL标准体系进行缩减或扩大,模板质粒终浓度保持30 ng/μL,无菌水补足至目标体积。
推荐的反应体积和对应的容器如下表:
| 反应体积 | 反应容器 |
| 30-50 μL | 96平底细胞培养板或1.5 mLEP管 |
| 80-120 μL | 1.5 mLEP管 |
| 200-300 μL | 48孔板 |
| 500-1000 μL | 24孔板 |
| 2-10 mL | 50 mL离心管 |
| 10-50 mL | 250 mL锥形瓶 |
案例展示
高通量scFv-His/VHH-His合成,支持AI筛选
数量:2000多个scFv-His和VHH-His合成
表达系统:CFPS
结果:成功完成了基因合成、抗体表达纯化,及其对多种靶点蛋白的亲和力检测(BLI)
Reducing SDS-PAGE(部分)

BLI结果(部分)
| KD: <1.0E-12M | KD: <1.0E-12M |
KD: <1.099E-08M |
KD: <1.0E-12M |
![]() | ![]()
| ![]()
| ![]()
|
无细胞合成与HEK293细胞表达的VHH体外抗原结合活性一致
| anti-IL6R VHH | anti-TROP2 VHH |
![]() Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized IL6R at 0.5 μg/ml (100 μL/well) can bind anti-IL6R VHH expressed by CFPS system and HEK293 Cell respectively. | ![]() Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized TROP2 at 0.5 μg/ml (100 μL/well) can bind anti-TROP2 VHH expressed by CFPS system and HEK293 Cell respectively. |
| anti-IL6R VHH | Cell-Free | HEK293 | anti-TROP2 VHH | Cell-Free | HEK293 |
| EC50(μg/mL) | 0.026 | 0.034 | EC50(μg/mL) | 0.179 | 0.164 |
CFKIT02.pdf